1. 染色后用特定溶液將組織中過(guò)多結(jié)合的染液脫去，這個(gè)過(guò)程稱為分化作用，所用溶液稱為分化液。在HE染色種常用低濃度鹽酸作為分化液，因?yàn)樗崮芷茐奶K木素的醌型結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)，使色素與組織分離而褪色。組織在經(jīng)蘇木素染色后，必須經(jīng)過(guò)分化去除組織中過(guò)多結(jié)合及非特異性吸附的染料，才能進(jìn)行伊紅染色，確保細(xì)胞核與胞漿顯色分明。可使用78NB10002蘇木素分化液。分化過(guò)程中，根據(jù)組織切片厚度、組織類(lèi)型等結(jié)合鏡下觀察適當(dāng)調(diào)整分化時(shí)間。

2. HE染色中蘇木素染色后的返藍(lán)很重要。蘇木素在酸性條件下為離子狀態(tài)，呈紅色；在堿性條件下呈藍(lán)色。組織切片經(jīng)酸性分化液分化后呈紅色或粉紅色，需立即水洗終止分化，再用弱堿性溶液使蘇木素，這個(gè)過(guò)程就是返藍(lán)作用。如果沒(méi)有專用的返藍(lán)液，用溫水浸洗也能使細(xì)胞核返藍(lán)，只是所需時(shí)間略長(zhǎng)。推薦78NB10003蘇木素返藍(lán)液。

3. 蘇木素及伊紅染色程度可以根據(jù)染色需要進(jìn)行調(diào)整染色時(shí)間。

4. 蘇木素染液可重復(fù)使用多次，每次用完后需密封保存，防止有效成分揮發(fā)。當(dāng)組織或細(xì)胞著色明顯偏淺或顏色異常時(shí)請(qǐng)更換新的染液。

5. 用于染色后脫水的無(wú)水乙醇純度需大于99.9%。如果乙醇含水，伊紅會(huì)褪色導(dǎo)致染色不均勻。

6. 伊紅染液(醇溶)可反復(fù)使用數(shù)次，當(dāng)組織著色明顯偏淺時(shí)建議更換新的染液。

7. 操作時(shí)請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服，佩戴一次性手套。